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米糠脂多糖提取物中分離蛋白質

作者:膜分離技術發表時間:2017-10-24 15:27

  米糠是富含植物脂多糖的植物資源。本文就米糠脂多糖制備過程中,蛋白與脂多糖的分離方法進行了研究。結果表明,電點沉淀法和超濾膜分離法的串聯應用可充分發揮兩者的分離特點,是眾多分離蛋白方法中較有效的方法。
 


 

  分離純化的早期,由于提取液體積大,成分復雜。因此在這一階段選用萃取、沉淀、吸附、膜分離等一些分辨力較低的手段比較有利。這些手段不僅負荷能力大、一次分離的量多,同時可以除去大部分理化性質相差較大的雜質,為以后進一步分離純化創造良以需予以先除去。

  幾種分離蛋白常用方法有:苯酚法、Sevag法、正丁醇法、叁氯乙酸法、等電點沉淀法和超濾法等。對于蛋白去除率有下列順序:超濾法>叁氯乙酸法>苯酚法>等電點沉淀法>Sevag法>正丁醇法。

  苯酚是一個弱酸,18℃~19℃時苯酚在水溶液中的解離常數為1.1~1.2×10-10。苯酚和水的混合相具有較高的介電常數。這兩個特點賦予了苯酚是許多蛋白的優良溶劑的性質,蛋白在酚相和水相中分配系數的差別很大,以致苯酚可以較完全地把蛋白從水相中提取至酚相中,而水溶、酚不溶的多糖、脂多糖則保留在水相中。而叁氯乙酸法分離蛋白的塬理與上述有機溶劑法不同,它通過與蛋白結合生成不溶性的鹽類,達到分離的目的。超濾是加壓膜分離技術之一,操作簡便,成本低廉,且不引起溫度及相的變化。超濾法的分離蛋白效果和LPS保留率均較好。但由于米糠水提液的固形物含量和蛋白含量較高,隨著超濾時間的增加,水通量有較嚴重的下降趨勢,原因是膜面可能受到米糠水提液中蛋白的污染,通路有所堵塞,可采用反沖清洗的方法加以解決。

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